SPECTROstar Nano
Lector de placa de absorbancia con puerto de cubeta
Información básica sobre los lectores de microplacas
¿Qué es un lector de microplacas?
Un lector de microplacas es un instrumento de laboratorio que se utiliza para medir reacciones, propiedades y analitos químicos, biológicos o físicos dentro del pocillo de una microplaca. Una microplaca consta de pequeños pocillos en los que tienen lugar reacciones separadas. En la microplaca, estas reacciones convierten la presencia de un analito o la progresión de procesos bioquímicos en señales ópticas. El lector de microplacas detecta estas señales y así cuantifica el parámetro de interés.
Los científicos de las industrias farmacéutica y de ciencias de la vida se esfuerzan por mejorar los procesos rutinarios de laboratorio y la eficiencia mediante el uso de productos o instrumentos capaces de ahorrar tiempo. Un lector de microplacas puede manejar hasta 3456 muestras en minutos o incluso segundos. Un lector de placas ayuda a minimizar el tiempo operativo y a ahorrar costos de reactivos, lo que permite a los investigadores dedicar más tiempo al análisis de datos y la generación de información procesable.
¿Para qué se utiliza un lector de microplacas?
Un lector de microplacas se utiliza para la cuantificación de varios ensayos biológicos y químicos en una microplaca. Hoy en día, la disponibilidad de una gran cantidad de kits de reactivos permite la explotación de un lector de microplacas en diferentes campos y para muchas aplicaciones diferentes. Además de la investigación biológica, celular, bioquímica, farmacéutica y el descubrimiento de fármacos, tanto en entornos académicos como industriales, los lectores de placas también se utilizan en el descubrimiento de fármacos, la investigación medioambiental y en la industria alimentaria o cosmética.
Principio de funcionamiento de un lector de microplacas
Un lector de microplacas detecta señales luminosas producidas por muestras que se han pipeteado en una microplaca. Las propiedades ópticas de estas muestras son el resultado de una reacción biológica, química, bioquímica o física. Diferentes reacciones analíticas dan como resultado diferentes cambios ópticos utilizados para el análisis. La absorbancia, la intensidad de la fluorescencia y la luminiscencia son los modos de detección más populares y utilizados en los laboratorios de todo el mundo. Además, los lectores de microplacas también están disponibles en modos avanzados como polarización de fluorescencia, fluorescencia con resolución temporal y AlphaScreen®.
Las mediciones basadas en microplacas detectan señales de luz producidas por una muestra, convertidas por una muestra o transmitidas a través de una muestra. En el lector de placas, la señal se mide mediante un detector, generalmente un tubo fotomultiplicador (PMT). Los PMT convierten los fotones en electricidad que luego es cuantificada por el lector de microplacas. El resultado de este proceso son números mediante los cuales se cuantifica una muestra.
Dependiendo de la naturaleza de los cambios de la señal óptica durante una reacción y, en consecuencia, del modo de detección, es posible que sea necesario excitar las muestras en una microplaca con luz a longitudes de onda específicas. Esta luz generalmente la proporciona una lámpara de destello de xenón de banda ancha. Para permitir la excitación de la muestra solo por longitudes de onda específicas, la luz producida por la lámpara es seleccionada por un filtro de excitación o monocromador específico. En los lectores de microplacas, para aumentar la sensibilidad y la especificidad, se emplean igualmente filtros o monocromadores en el lado de emisión/detección. Por lo general, se colocan entre la microplaca y el detector.
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¿Cómo encuentro el lector de microplacas adecuado?
¿Qué ensayos me gustaría hacer?
Cuando se va a adquirir un lector de placas, ya se conocen aplicaciones que se van a medir. Sin embargo, tiene sentido prestar más atención a esta pregunta para encontrar el lector adecuado y preparado para el futuro del laboratorio. Por un lado, tendrás que realizar ensayos básicos para cuantificar biomoléculas como ácidos nucleicos y proteínas, o viabilidad celular. Para todas estas aplicaciones, hay varias soluciones disponibles que se basan en diferentes principios, modos de detección y sensibilidades. Por lo tanto, es importante saber de antemano el nombre exacto y el proveedor del kit o la química que desea utilizar en su lector de placas. Por otro lado, existen miles de pruebas que responden a preguntas biológicas específicas. Puede haber soluciones a problemas que normalmente resuelve con pruebas engorrosas, aunque existen soluciones más simples basadas en microplacas. Por lo tanto, revisar su trabajo de laboratorio diario y recopilar información sobre cómo los colegas usan los lectores de microplacas es un paso fundamental antes de comprar un lector de placas. Alternativamente, puede encontrar innumerables sugerencias sobre cómo un lector de microplacas puede simplificar su investigación en nuestras "áreas de investigación".
¿Qué modo de detección necesito para mi ensayo?
Los diferentes ensayos se detectan de manera diferente, aunque puedan responder a la misma pregunta biológica. Si ya identificó kits comerciales, encontrará el modo de detección requerido en el prospecto del producto. De lo contrario, los modos de detección que están disponibles en un lector de microplacas y para qué se usan normalmente se describen a continuación.
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Absorbancia
La absorbancia mide la cantidad de luz que se pierde (absorbe) cuando se transmite a través de una muestra. Las moléculas a menudo absorben luz a una longitud de onda específica y pueden cuantificarse midiendo su absorbancia. La capacidad de selección de longitud de onda es obligatoria en un lector de microplacas de absorbancia y se puede lograr con filtros, monocromadores o espectrómetros. Las aplicaciones típicas que lee un lector de microplacas de absorbancia son:
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Intensidad de fluorescencia (incl. FRET)
La fluorescencia es la absorción de energía luminosa y su transformación en luz de emisión, junto a la energía cinética y el calor. Dado que la luz emitida tiene menos energía que la luz de entrada, la emisión siempre tiene una longitud de onda más alta. El proceso de absorción de energía, conversión de energía y emisión de luz es rápido y ocurre en un marco de tiempo de nanosegundos. Por lo tanto, la detección de la intensidad de la fluorescencia se produce de la siguiente manera en un lector de placas: excitación con luz a una longitud de onda específica y detección de la emisión de luz a una longitud de onda más alta aproximadamente al mismo tiempo. La selección de la longitud de onda se logra a través de filtros o monocromadores. La intensidad de la fluorescencia es lineal a la concentración de un fluoróforo y, en consecuencia, se utiliza para cuantificar moléculas fluorescentes (o marcadas con fluorescencia). Otras aplicaciones de intensidad de fluorescencia emplean un cambio en la emisión de fluorescencia o un aumento de la fluorescencia al interactuar con una molécula de interés para detectar una molécula específica. Las aplicaciones típicas de fluorescencia detectadas por un lector de placas de fluorescencia son las siguientes:
Ensayos de viabilidad celular Ensayo de resazurina, Calcein-AM Ensayos de agregación Tioflavina T (RT-QuIC) Ensayos de actividad enzimática 4-metilumbeliferona (4-MU), ensayos basados en NADH, 7-amino-4-metilcumarina (AMC) Especies de oxígeno reactivas Ensayo H2DCFDA, ensayo DCF Cuantificación de ácidos nucleicos Ensayos Qubit, ensayos Quant-iT (por ejemplo, PicoGreen) -
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Luminiscencia (incluido BRET)
La emisión de luz sin excitación previa se denomina luminiscencia. La producción de luminiscencia en los experimentos de ciencias de la vida se produce como resultado de una reacción química y es espontánea o necesita catálisis enzimática. En una reacción de luminiscencia espontánea, el sustrato y los cofactores deben estar presentes para generar luz. Para una reacción de luminiscencia dependiente de enzimas, es esencial una enzima funcional. Tal enzima se llama luciferasa. Para detectar la luz emitida por un ensayo de luminiscencia en un lector de placas, es necesario un detector. Por lo general, toda la luz que proviene de un pozo es concentrada por una lente y guiada hacia el detector. En consecuencia, un lector de placas de luminiscencia no se basa en filtros ni en una fuente de excitación. Para los ensayos de emisión dual, la selección de la longitud de onda se logra a través de filtros o monocromadores. Este modo de detección muy sensible se utiliza para estudiar lo siguiente:
Ensayos de viabilidad celular CellTiterGlo Ensayos de reportero Ensayo de reportero de luciferasa dual Receptor-ligando-unión Ensayos basados en BRET -
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Polarización de fluorescencia
Otro modo de detección basado en fluorescencia usa luz polarizada para excitar la molécula fluorescente. El cambio de polarización de la luz emitida se determina midiendo la emisión en el plano paralelo y perpendicular con respecto al plano de polarización de excitación. Los cambios en la polarización de la fluorescencia resultan de diferencias en los pesos moleculares. Las moléculas pequeñas y ligeras se mueven rápidamente y despolarizan la emisión de fluorescencia, mientras que las moléculas más grandes se mueven lentamente y retienen la polarización de la fluorescencia. Este principio permite estudiar lo siguiente:
Ensayos de unión competitiva Detección de nucleótidos para informar sobre actividades Ensayos de transcribador -
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AlphaScreen
La tecnología AlphaScreen (ensayo homogéneo de proximidad luminiscente amplificado) utiliza perlas que liberan oxígeno singlete cuando se excitan con luz roja (680 nm). Las moléculas de oxígeno singlete se mueven hasta 200 nm y reaccionan con tioxeno en una reacción quimioluminiscente. Otras transferencias de energía conducen a señales de luminiscencia amplia entre 520 y 620 nm oa señales con longitudes de onda discretas. Si las perlas donantes (liberación de oxígeno singlete) y las perlas aceptoras están muy cerca, se emite una señal luminiscente y el lector puede detectarla. Estas perlas generalmente se unen mediante anticuerpos que se unen específicamente al mismo analito o que se acoplan a moléculas que interactúan entre sí. Para la detección AlphaScreen en un lector de placas, la excitación a 680 nm se combina con una lectura de luminiscencia que se retrasa en el tiempo, en comparación con la excitación. AlphaScreen se usa a menudo para aplicaciones de alto rendimiento que estudian lo siguiente:
Proteína, cuantificación de citoquinas Ensayos AlphaLISA Fosforilaciones de proteínas Ensayos Alpha SureFire Interacciones proteína-proteína Ensayos AlphaScreen -
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Nefelometría
La nefelometría es una técnica utilizada para medir la cantidad de turbidez en una solución causada por la presencia de partículas insolubles suspendidas. Cuando se dirige a través de una solución que contiene partículas sólidas suspendidas, la luz se transmite, se absorbe y se dispersa (se refleja en las partículas). La nefelometría cuantifica directamente la intensidad de la luz dispersada por partículas insolubles en la muestra. Un nefelómetro es un lector que contiene una fuente de luz, un detector dispuesto en ángulo recto con respecto al haz de luz y, en medio, un colector óptico de dispersión de luz. Este principio permite estudiar lo siguiente:
Solubilidad de las drogas Crecimiento microbiano -
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Fluorescencia resuelta en el tiempo
La fluorescencia resuelta en el tiempo (TRF) es un método basado en la fluorescencia que requiere la excitación de la muestra a una longitud de onda específica y la detección de la fluorescencia emitida a una longitud de onda diferente. En comparación con la intensidad de fluorescencia convencional, la emisión dura un milisegundo en lugar de un marco de tiempo de nanosegundos. Esto es posible gracias a los lantánidos, tierras raras con características de fluorescencia de larga duración. Los lectores miden la señal de emisión con un retardo a la excitación, evitando la detección de fondo y autofluorescencia. TRF se emplea para estas aplicaciones:
Ensayos metabólicos sondas solubles para medir la acidificación extracelular y el consumo de oxígeno Cuantificación de biomoléculas y proteínas Inmunoensayo, DELFIA -
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TR-FRET
FRET resuelto en el tiempo (TR-FRET) es una tecnología de detección que combina la fluorescencia resuelta en el tiempo (TRF) con la transferencia de energía de resonancia (FRET) de Förster. TR-FRET se utiliza principalmente para analizar eventos de unión y para la detección de drogas de alto rendimiento. FRET describe una transferencia de energía entre dos fluoróforos. La transferencia depende de la proximidad espacial entre donante y aceptor y del solapamiento entre el espectro de emisión del donante y el de excitación del aceptor. Los kits TR-FRET incluyen HTRF, Lanthascreen, Transcreener y THUNDER, y se emplean para estas aplicaciones:
Estudios vinculantes Ensayos basados en TR-FRET
Nuestros lectores monomodo
Estos lectores de microplacas pueden medir un solo modo de detección (normalmente absorbancia, luminiscencia o intensidad de fluorescencia). Estos lectores son la mejor opción cuando ya está claro que el instrumento se utilizará para una sola aplicación. Tales tareas suelen ser ensayos a largo plazo que bloquean el lector de microplacas para otras mediciones. Por lo tanto, un modo de detección es suficiente. Ejemplos de tales estudios son el control del crecimiento microbiano, que dura uno o más días, o los experimentos con tioflavina T, que duran hasta 7 días. Un lector de un solo modo de detección satisface a su laboratorio si puede realizar todos sus ensayos en un solo modo. Por ejemplo, con lectores de absorbancia podrá medir actividades enzimáticas, cantidad de ADN y proteínas, viabilidad celular y mucho más. Sin embargo, está limitado a ensayos que pueden tener menor sensibilidad o especificidad que los ensayos que emplean otros modos de detección. Si actualmente planifica aplicaciones basadas solo en un modo de detección pero no está seguro de lo que le depara el futuro, busque lectores de placas que luego se puedan actualizar a instrumentos multimodo.
LUMIstar Omega
Luminómetro de microplaca dedicado
SPECTROstar Omega
Lector de placa de absorbancia con espectrometro UV / vis ultrafast
NEPHELOstar Plus
Nefelómetro de microplacas para mediciones de dispersión de luz y turbidez
Nuestros lectores multimodo
Los instrumentos capaces de leer dos o más modos de detección se denominan lectores de microplacas multimodo. Por lo general, los lectores multimodo incluyen absorbancia, intensidad de fluorescencia y luminiscencia, y posiblemente modos de detección avanzados. Ofrecen una mayor flexibilidad en cuanto a los ensayos que son posibles de leer. Los lectores multimodo se recomiendan siempre que muchos usuarios trabajen en la máquina, cuando sus aplicaciones cambien de un proyecto a otro o si ya sabe que necesita leer ensayos con diferentes modos de detección. Además, un lector de placas multimodo es más rentable que varios lectores monomodo dedicados.
PHERAstar FSX
Lector de placas HTS potente y sensible
CLARIOstar Plus
El lector de placas más versátil para desarrollo de ensayos
VANTAstar
Lector de microplacas flexible con flujos de trabajo simplificados
Omega Series
Serie de lectores de microplacas de uno o varios modos actualizables
6 hasta 96 placas de pocillos
Hasta placas de 96 pozos, a menudo hay una buena señal que se puede detectar fácilmente, y 96 pozos se miden comparativamente rápido. Pueden ser leídos por la mayoría de los lectores de microplacas. Se requieren alta sensibilidad y velocidad para estos formatos de placa si desea examinar mediciones cinéticas rápidas como flujos de calcio o ensayos con pequeños cambios de señal como biosensores.
Image ©Greiner Bio-One GmbH
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Placas de 384 pocillos
Cuando se trabaja con placas de 384 pocillos, la velocidad de detección y la sensibilidad del lector de placas se vuelven muy importantes. Para lecturas fluorescentes, el uso de un sistema de enfoque es beneficioso ya que aumenta la sensibilidad. Se recomiendan lectores de placas que eviten la diafonía para la medición de luminiscencia en placas de 384 pocillos. Como los pozos de esta placa están más juntos, es más probable que la luz brille en los pozos adyacentes.
Image ©Greiner Bio-One GmbH
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Placas de pocillos de 1536 y 3456
Dado que estos formatos de placa son muy densos y solo se pueden utilizar con volúmenes bajos (< 10 µl), se necesitan lectores de microplacas dedicados para medirlos. Requieren un posicionamiento exacto, alta velocidad y sensibilidad para registrar las señales más pequeñas en el menor tiempo posible.
Image ©Greiner Bio-One GmbH
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Placa LVis
Esta microplaca está diseñada para medir la absorbancia en pequeños volúmenes. Normalmente se utiliza para determinar la concentración de ácidos nucleicos y proteínas. La placa LVis contiene 16 puntos que se pueden cargar con 2 microlitros de muestra para mediciones de absorbancia posteriores. La placa LVis es transparente en el rango de luz ultravioleta y es compatible con todos los lectores de microplacas BMG LABTECH.
Atmospheric Control Unit
Ensayos basados en células mejoradas
Evaluation Plate
Validación funcional
Filters
Filtros para una amplia gama de aplicaciones.
LVis Plate
Medidas de bajo volumen
Microplate Stacker
Sistema de manejo de microplacas
THERMOstar
Incubación inteligente de microplacas
¿Cuál es mi presupuesto?
Cuando se trata de la decisión de comprar un lector de microplacas, el presupuesto, por supuesto, juega un papel importante.
El precio de un lector de microplacas depende del equipamiento técnico y del número de modos de detección que el dispositivo pueda medir. El rango de precio de un lector comienza en 2.500 Euro/Dólares para un lector de microplacas ELISA basado en filtro simple y puede llegar a más de 150.000 Euro/Dólares para un lector de microplacas multimodo de gama alta con varios modos de detección y la mejor tecnología. para mayor sensibilidad y tiempos de lectura más rápidos.
Pero tenga cuidado con su elección y no considere solo sus necesidades actuales, sino también las futuras de su lector de placas.
Esté atento a la posibilidad de actualizar su lector de microplacas con funciones adicionales o modos de detección en cualquier momento. Si tiene la oportunidad de actualizar más tarde, no necesita comprar un lector de microplacas adicional para futuras aplicaciones. Esto ahorra no solo dinero y espacio útil en su laboratorio, sino también el tiempo que debe acostumbrarse a un nuevo lector de placas o marca.
Además de los costos del propio lector de microplacas, tenga en cuenta los posibles costos ocultos adicionales, por ejemplo, tarifas de servicio, soporte, actualizaciones de software y licencias o paquetes de reactivos incluidos.
También tenga en cuenta que aunque los lectores basados en filtros suelen ser más baratos que los instrumentos basados en monocromadores, debe comprar diferentes filtros para diferentes longitudes de onda. Asegúrese de tener en cuenta esos costos también.
¿Por qué elegir un lector BMG LABTECH?
BMG LABTECH está especializado en la producción de lectores de microplacas y cuenta con 30 años de experiencia completa en tecnología de lectura de microplacas. Este conocimiento se hace visible en los resultados que ofrecen nuestros instrumentos: ¡el único factor que cuenta en su laboratorio! Los usuarios de BMG LABTECH pueden confiar en recibir los mejores resultados en sensibilidad, velocidad y flexibilidad. Además, nuestros lectores de placas están desarrollados para proporcionar un rendimiento óptimo durante años. Nuestros instrumentos se desarrollan, producen y prueban en Alemania y están fabricados para ser extremadamente robustos y fiables.
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