PHERAstar FSX
Lector de placas HTS potente y sensible
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¿Qué considerar al elegir un lector de absorbancia?
Si está buscando un nuevo lector de absorbancia (monomodo o multimodo), hay algunos factores que debe tener en cuenta, ya que el rendimiento del instrumento puede afectar significativamente la calidad de los datos de su investigación.
Selección de longitud de onda
La capacidad de seleccionar longitudes de onda es obligatoria para un lector de absorbancia y depende del tipo de detectores que se utilicen.
Normalmente se utilizan dos tipos diferentes de detectores: espectrómetros de tubos fotomultiplicadores (PMT) o dispositivos de carga acoplada (CCD).
El lector de microplacas basado en PMT requiere una herramienta de selección de longitud de onda entre la fuente de luz y el pozo. Los filtros ópticos o monocromadores seleccionan la longitud de onda deseada antes de enviar la luz a la sonda. De esta manera, solo la luz en una longitud de onda deseada se transmite, llega al PMT y se cuantifica.
Para escanear espectros o un rango de longitudes de onda, el lector de microplacas basado en PMT requiere un monocromador. El monocromador selecciona las longitudes de onda deseadas y las mide secuencialmente con el movimiento mecánico. Para mediciones de múltiples longitudes de onda discretas, se requieren múltiples mediciones individuales con diferentes filtros o una exploración monocromatica.
El lector de microplacas basado en espectrómetro CCD no requiere una herramienta de selección de longitud de onda. El espectrómetro separa las diferentes longitudes de onda presentes en la luz transmitida a través de la sonda a medida que se dirigen al detector CCD. Esto captura la intensidad de todas las longitudes de onda a la vez, a diferencia de un monocromador. De esta manera, se pueden adquirir espectros, longitudes de onda discretas únicas o múltiples en un corto período de tiempo, ya que no se requiere un escaneo mecánico como en los monocromadores.
Si su ensayo o aplicación necesita adquisición espectral, los espectrómetros CCD son significativamente más rápidos que los monocromadores, ya que no se requiere exploración espectral mecánica.
Formatos de microplacas compatibles
Los lectores monomodo y multimodo de BMG LABTECH están equipados con un espectrómetro UV/vis para mediciones de absorbancia. Esto captura un espectro de rango completo de 220 a 1000 nm en menos de un segundo/pocillo.
Agitación e incubación
Cuando busque un lector de absorbancia, debe considerar la naturaleza de su investigación y del ensayo que desea realizar. En general, la agitación y la incubación son dos características importantes. La incubación es de vital importancia cuando se realizan ensayos enzimáticos a temperaturas estables, por ejemplo, 37 °C. Las múltiples opciones de agitación permiten una mezcla adecuada. Para aplicaciones como ensayos de crecimiento celular en bacterias o levaduras (OD600), la agitación de la placa es crucial para una buena oxigenación y, en consecuencia, una rápida replicación celular.
Compatibilidad con cubetas
Tradicionalmente, las mediciones de absorbancia se realizaban en cubetas con una longitud de paso normalizada de 1 cm. En las microplacas, la longitud del camino cambia según el volumen y el formato de la placa. Si se miden soluciones acuosas, la medición de la microplaca se puede normalizar mediante la corrección de la longitud del trayecto del pico de agua. Si, a pesar de esta opción, para su investigación aún necesita ocasionalmente medir en cubetas, asegúrese de que el lector de microplacas de su elección tenga un puerto de cubetas integrado como el SPECTROstar Nano o adaptadores de placa para medir cubetas horizontalmente como el LVis Plate.
Software para reducción de datos
Generalmente, el software que ejecuta el lector de microplacas es una parte muy subestimada del paquete. Para algunos lectores, el software solo controla el proceso de medición y proporciona una salida de datos de ensayo sin procesar. En otros casos, puede realizar análisis de datos complejos.
Un software integral, fácil de usar y flexible puede facilitarle la vida, simplificar la detección y el análisis de datos para que pueda aprovechar al máximo su instrumento.
Las funciones de cálculo más útiles para los ensayos de absorbancia incluyen la sustracción automática del blanco, el cálculo automático de concentraciones basado en curvas estándar para ensayos ELISA o en la ley de Beer-Lambert, relaciones 260/280, correcciones de longitud de trayectoria y constantes enzimáticas como Km y Vmax.
En el paquete de software BMG LABTECH, los ensayos más comunes tienen protocolos específicos de ensayos de ejecución rápida predefinidos y plantillas de análisis dedicadas. A través de estas soluciones dedicadas, la adquisición y el análisis se realizan con un solo clic del mouse, lo que permite a los investigadores realizar experimentos de forma rápida y sencilla.
Nuestros lectores de absorbancia
La detección de absorbancia se puede realizar en los lectores de microplacas multimodo PHERAstar FSX, CLARIOstar Plus, VANTAstarTM, FLUOstar y SPECTROstar Omega, y en los lectores de placa monomodo SPECTROstar Nano.
Todos nuestros lectores de absorbancia están equipados con una lámpara de flash de xenón de alta intensidad y un espectrómetro CCD.
BMG LABTECH fue la primera empresa en emplear un espectrómetro UV/vis en lugar de filtros o monocromadores para la detección de absorbancia. Al iluminar la sonda con una lámpara de destello de xenón de alta potencia, el espectrómetro UV/vis ultrarrápido de BMG LABTECH recopila todo el espectro en lugar de una longitud de onda específica. Captura todas las longitudes de onda de 220 a 1000 nm a una resolución de 1 a 10 nm en menos de 1 segundo por pocillo.
Como alternativa, la detección de absorbancia basada en filtros (basada en PMT) está disponible en el FLUOstar Omega.
CLARIOstar Plus
El lector de placas más versátil para desarrollo de ensayos
VANTAstar
Lector de microplacas flexible con flujos de trabajo simplificados
Omega Series
Serie de lectores de microplacas de uno o varios modos actualizables
SPECTROstar Nano
Lector de placa de absorbancia con puerto de cubeta
¿Qué ensayos se pueden medir con un lector de absorbancia?
La absorbancia es uno de los modos de detección más populares para aplicaciones de ciencias de la vida. En consecuencia, existe una multitud de kits y reactivos disponibles en el mercado para las más diferentes aplicaciones y tipos de ensayos que un lector de absorbancia puede cubrir como instrumento monomodo o multimodo. Se han adaptado varios ensayos colorimétricos a placas o se han desarrollado directamente para su uso en un lector de microplacas.
Una de las aplicaciones más comunes es la cuantificación de ADN/ARN a 260 nm. También es posible cuantificar una proteína específica en solución, normalmente mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). También se encuentran disponibles varios métodos colorimétricos para la cuantificación de proteínas. En nuestro artículo de blog "Medición de proteínas: encuentre un método adecuado" encontrará descripciones detalladas de ensayos de cuantificación de proteínas como Bradford, BCA y consejos para ayudarlo a elegir.
Otra aplicación que puede medir lector de absornancia es el crecimiento celular en bacterias y levaduras al medir la "densidad óptica a 600 nm" (OD600) o la viabilidad celular mediante ensayos colorimétricos.
Ejemplos de aplicaciones con lectores de absorbancia BMG LABTECH:
Los siguientes son ejemplos de aplicaciones de absorbancia reaizadas en lectores de microplacas BMG LABTECH:
- AN 362: DNA purity ratio – fast and easy absorbance-based evaluation of nucleic acid quality
- AN 341: Highly sensitive ELISAs in 90 minutes: SimpleStep ELISA kits and the SPECTROstar Nano
- AN 299: Absorbance-based methods for protein quantification on BMG LABTECH instrumentsAN 303: Detection of plant-synthesized nanoparticles and their antibacterial capacity
Vea una lista completa de notas de aplicación de absorbancia.
¿Por qué elegir un lector de absorbancia BMG LABTECH?
BMG LABTECH is specialised in producing microplate readers only and brings more than 30 years of full expertise in microplate reading technology. This knowledge gets visible in the results that our instruments deliver - the only factor that counts in your lab! Our users can trust to obtain best results in sensitivity, speed and flexibility. Moreover, our single and multi-mode plate readers are developed to provide optimum performance for years. Our instruments are developed, produced and tested in Germany and are built to be extremely robust and reliable.
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Due to their modularity, all our multimode plate readers can be equipped with different detection modes and cover a multitude of applications. Additional features can be upgraded. This gives you the chance to keep your options open even if you don’t use the full scope of your microplate reader right at the bat.
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Multi-user software package
All our instruments come with a multi-user software package that can be installed on as many computers as users requires, without the need to purchase licenses. Software updates for our microplate readers are of no charge within the first 12 month after purchase.