NEPHELOstar Plus
Nefelómetro de microplacas para mediciones de dispersión de luz y turbidez
Información básica sobre nefelómetros
Un nefelómetro es un instrumento dedicado a la medición de la turbidez de una muestra. La turbidez generalmente es causada por la presencia de partículas insolubles suspendidas en un líquido o gas. Se usa un nefelómetro para medir la dispersión de la luz (luz reflejada por las partículas en una muestra), no la atenuación de la luz (absorbancia) causada por la turbidez.
Los lectores de microplacas de nefelómetro miden partículas insolubles presentes en soluciones líquidas en el pocillo de una microplaca. La solución en el pocillo recibe un rayo de luz perpendicular al plano de la microplaca. Las partículas suspendidas en la solución dispersarán este haz de luz. En el nefelómetro, la luz dispersada es recolectada por un detector colocado a un lado a 90° de la fuente de luz. La salida del instrumento es la intensidad de la dispersión.
La densidad de partículas se calcula en función de la dispersión de la luz. Hasta cierto punto, la dispersión para una determinada densidad de partículas depende de las propiedades específicas de las partículas, como su tamaño, color y forma.
Los lectores de microplacas de nefelómetro son instrumentos que se utilizan principalmente para monitorear la turbidez y la presencia de partículas en varios campos, como el descubrimiento y la detección de fármacos, la investigación académica en ciencias de la vida y el monitoreo de la calidad del agua. En las pruebas de calidad del agua, los instrumentos de dispersión también se denominan turbidímetros.
Existe una amplia variedad de instrumentos en el mercado para diferentes aplicaciones de dispersión o turbidez. Las diferencias entre los instrumentos dependen principalmente de la posición y el ángulo entre la fuente de luz y el detector.
Parte de la nefelometría, pero no relevante para los lectores de microplacas de nefelómetro, es la medición de la dispersión de aerosoles (p. ej., contaminación por polvo en el aire) o el estudio de las atmósferas planetarias mediante nefelómetros de fase gaseosa.
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¿Qué tener en cuenta a la hora de elegir un nefelómetro?
Si está buscando un nefelómetro o turbidímetro en el mercado, hay algunos factores que debe tener en cuenta, ya que el rendimiento puede afectar significativamente la calidad de los datos de su investigación.
Nefelometría o turbidimetría
La dispersión se puede medir tanto por nefelometría como por turbidimetría. Aunque estos dos términos se usan a veces como sinónimos, técnicamente no lo son, como se mencionó anteriormente. La turbidimetría es básicamente una medición de absorbancia y se puede realizar en un lector de microplacas de absorbancia (turbidímetro). Para medir la nefelometría (dispersión directa), se necesita un nefelómetro dedicado.
Al desarrollar un método de dispersión, la elección del instrumento entre nefelómetro y turbidímetro está determinada por dos factores. La consideración más importante es la sensibilidad. Si la muestra contiene una pequeña concentración de partículas dispersas, la mejor opción es un nefelómetro. Un turbidímetro es una opción adecuada cuando las muestras tienen una alta concentración de partículas dispersas. En NEPHELOstar Plus, las partículas insolubles ligeramente dispersas se detectan en ángulos de incidencia de hasta 80o. Esto hace que este nefelómetro sea aproximadamente treinta veces más sensible que los lectores de absorbancia tradicionales, midiendo la reducción de la luz directa que pasa a través de un pozo de muestra.
Al desarrollar un método de dispersión, la elección del instrumento entre nefelómetro y turbidímetro está determinada por dos factores. La consideración más importante es la sensibilidad. Si la muestra contiene una pequeña concentración de partículas dispersas, la mejor opción es un nefelómetro. Un turbidímetro es una opción adecuada cuando las muestras tienen una alta concentración de partículas dispersas. En NEPHELOstar Plus, las partículas insolubles ligeramente dispersas se detectan en ángulos de incidencia de hasta 80o. Esto hace que este nefelómetro sea aproximadamente treinta veces más sensible que los lectores de absorbancia tradicionales, midiendo la reducción de la luz directa que pasa a través de un pozo de muestra.
Flexibilidad
Aunque un nefelómetro es un instrumento de un solo propósito, se debe considerar la flexibilidad de todos modos. Esto se relaciona principalmente con el haz de luz, ya que juega un papel importante al medir la dispersión. Una característica exclusiva de NEPHELOstar Plus es la intensidad ajustable y el diámetro del haz de la fuente de luz láser.
En un nefelómetro, la capacidad de ajustar la intensidad del rayo láser mejora la sensibilidad y proporciona el mejor rendimiento. Con un ancho de haz estrecho, se reducen los efectos de la superficie del líquido, como un menisco fuerte. Además, permite un mejor rendimiento en microplacas de alta densidad de hasta 384 pocillos.
Según el ensayo, el control preciso de la temperatura, las capacidades de agitación multimodo y el control atmosférico o una ventilación de gas pueden ser beneficiosos.
Formatos de microplacas compatibles
Comúnmente, los ensayos nefelométricos se miden en microplacas de 96 pocillos. Sin embargo, si tiene varias muestras y/o desea ahorrar valiosos reactivos o tiempo, también se pueden utilizar placas de 384 pocillos. Dado que la dispersión también puede ser causada por el polvo, la suciedad o los rasguños en el fondo de un pozo, las microplacas utilizadas para nefelometría deben tratarse con sumo cuidado.
inyectores de reactivos
Dependiendo de la naturaleza del ensayo que desee ejecutar, la disponibilidad de inyectores de reactivos en un nefelómetro podría resultar beneficiosa. Al pipetear manualmente los reactivos en los pocillos, puede correr el riesgo de perder datos importantes sobre su reacción. Especialmente para respuestas rápidas, es posible que el evento que está buscando ya haya desaparecido antes de que el nefelómetro pueda detectarlo.
Nuestro nefelómetro
La detección basada en nefelometría se puede realizar en NEPHELOstar Plus, el único nefelómetro de microplacas basado en láser del mundo. El NEPHELOstar Plus utiliza un láser específico con intensidad y diámetro ajustables como fuente de luz y una esfera de Ulbricht para recoger la luz dispersa con un ángulo de hasta 80 grados. Gracias a estas características, este nefelómetro puede superar las mediciones simples de turbidimetría.
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¿Qué ensayos se pueden medir con un nefelómetro?
En ciencias de la vida, los nefelómetros se utilizan principalmente en laboratorios farmacéuticos para probar la solubilidad de las drogas, también en exámenes automatizados. En los laboratorios bioquímicos, las principales aplicaciones de un nefelómetro incluyen la interacción proteína-proteína, la agregación de proteínas y los estudios de polimerización. En inmunología, la detección nefelométrica tiene su principal aplicación en el desarrollo de nuevos anticuerpos y el análisis de su capacidad de unión a antígenos.
La flexibilidad y el rendimiento de NEPHELOstar Plus permiten adaptar más aplicaciones que nunca a la nefelometría láser basada en microplacas. Estos incluyen también ensayos de floculación y cinética de crecimiento bacteriano y fúngico.
Exámenes automatizados de solubilidad de fármacos
La determinación de la solubilidad de los compuestos acuosos se ha convertido en una medida inicial esencial en el proceso de descubrimiento de fármacos. Esto está destinado a evitar ADME screen de compuestos de baja solubilidad que son costosos , que consumen mucho tiempo y se puede realizar con un alto rendimiento en un nefelómetro. Se ha demostrado que el método de dispersión produce resultados equivalentes a los producidos por un método de HPLC y que no se ve afectado en gran medida por las soluciones coloreadas.
Cinética de crecimiento microbiano
La monitorización nefelométrica continua de los cambios en la dispersión se puede utilizar para probar fármacos antimicrobianos y sus efectos sobre la cinética de crecimiento microbiano. Entre varios parámetros de las curvas de crecimiento, la duración de la fase de latencia se ve muy afectada por la presencia de fármacos antimicrobianos. Esta primera parte de la curva de crecimiento se puede controlar de forma más exacta utilizando NEPHELOstar Plus en lugar de un fotómetro tradicional.
Cuantificación de proteínas
En química clínica, los ensayos inmunonefelométricos se utilizan para determinar la concentración de inmunoglobulinas séricas (IgA, IgG, lgM), componentes del complemento (C3, C4), proteínas reactivas de fase aguda (PCR, transferrina), albúmina y alfa-1-antitripsina. La precipitación de proteínas de proteínas globulares se refiere a la formación de agregados de proteínas añadiendo, por ejemplo, sal o disolvente orgánico. Por el contrario, la inmunoprecipitación permite que una determinada proteína se precipite selectivamente a través de una reacción antígeno-anticuerpo.
Seguimiento de la polimerización
En química orgánica, la nefelometría se utiliza para cuantificar macromoléculas, por ejemplo, controlando una reacción de polimerización.
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¿Qué ensayos se pueden medir con un nefelómetro?
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