Informações básicas sobre nefelômetros
Um nefelômetro é um instrumento dedicado à medição da turbidez ou nebulosidade de uma amostra. A turbidez é geralmente causada pela presença de partículas insolúveis suspensas em um líquido ou gás. Um nefelômetro é usado para medir a dispersão da luz (luz refletida nas partículas de uma amostra), não a atenuação da luz (absorbância) causada pela turbidez.
Os leitores de microplacas nefelômetros medem partículas insolúveis presentes em soluções líquidas no poço de uma microplaca. A solução no poço é atingida por um feixe de luz perpendicular ao plano da microplaca. Partículas suspensas na solução irão espalhar este feixe de luz. No nefelômetro, a dispersão da luz é coletada por um detector posicionado em um dos lados a 90° da fonte de luz. A saída do instrumento é a intensidade da dispersão.
A densidade das partículas é calculada em função da dispersão da luz. Até certo ponto, a dispersão para uma determinada densidade de partículas depende de propriedades específicas das partículas, como tamanho, cor e forma.
Os leitores de microplacas nefelômetros são instrumentos usados principalmente para monitorar a turbidez e a presença de partículas em vários campos, como descoberta e triagem de medicamentos, pesquisa acadêmica em ciências biológicas e monitoramento da qualidade da água. Nos testes de qualidade da água, os instrumentos de dispersão também são chamados de turbidímetros.
Existe uma grande variedade de instrumentos no mercado para diferentes aplicações de dispersão ou turbidez. As diferenças entre os instrumentos dependem principalmente da posição e do ângulo entre a fonte de luz e o detector.
Parte da nefelometria, mas não relevante para os leitores de microplacas nefelômetros, é a medição da dispersão de aerossóis (por exemplo, poluição de poeira no ar) ou o estudo de atmosferas planetárias por nefelômetros de fase gasosa.
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O que é um nefelômetro?
Um nefelômetro é um instrumento que contém uma fonte de luz, um detector disposto em ângulo reto com o feixe de luz e entre um coletor óptico de dispersão de luz. Os nefelômetros são instrumentos dedicados que podem detectar apenas a dispersão e estão disponíveis apenas como leitores de placas independentes.
No NEPHELOstar Plus da BMG LABTECH, um diodo laser (a 635 nm) com um feixe altamente colimado é usado como fonte de luz de alta intensidade. O feixe de laser passa pelo poço da amostra. Se não houver partículas espalhando a luz, ela passa direto e nenhum sinal é gerado. No caso de partículas estarem presentes na amostra, a luz é dispersada em um coletor de luz espalhada chamado esfera de Ulbricht. Aqui, a luz é refletida no interior da esfera e, finalmente, detectada pelo fotodiodo do nefelômetro.
Em soluções líquidas, a relação entre a concentração de partículas espalhadas e a intensidade da luz espalhada é linear em uma ampla faixa de concentrações. Desta forma, um nefelômetro pode ser usado para medir a concentração de partículas por meio da detecção de espalhamento de luz. A concentração de uma amostra resulta, portanto, da intensidade do espalhamento produzido por suas partículas. Esta quantidade depende da natureza (tamanho, cor, forma, refletividade) das partículas.
A unidade de turbidez, medida com um nefelômetro calibrado ou instrumento turbidímetro para monitoramento ambiental, é a Unidade Nefelométrica de Turbidez (NTU). No entanto, a medição de dados de turbidez com um nefelômetro calibrado é um processo demorado e de várias etapas que emprega grandes volumes de amostra.
Na nota de aplicação Melhorando o rendimento para avaliar unidades nefelométricas de turbidez (NTUs) usando o NEPHELOstar Plus, nosso nefelômetro fornece maior rendimento e uma abordagem simplificada e de baixo volume para a coleta de dados NTU. Os dados expressos em RNUs (Unidades Relativas de Nefelometria) coletados no NEPHELOstar Plus são comparados com os resultados NTU de um instrumento convencional.
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O que considerar ao escolher um nefelômetro?
Se você está procurando um nefelômetro ou turbidímetro no mercado, há alguns fatores a serem levados em consideração, pois o desempenho pode afetar significativamente a qualidade de seus dados de pesquisa.
Nefelometria ou turbidimetria
A dispersão pode ser medida tanto por nefelometria quanto por turbidimetria. Embora esses dois termos sejam usados às vezes como sinônimos, tecnicamente não são, como mencionado acima. A turbidimetria é basicamente uma medida de absorbância e pode ser realizada em um leitor de microplacas de absorbância (turbidímetro). Para medir a nefelometria (dispersão direta), é necessário um nefelômetro dedicado.
Ao desenvolver um método de dispersão, a escolha do instrumento entre nefelômetro e turbidímetro é determinada por dois fatores. A consideração mais importante é a sensibilidade. Se a amostra contiver uma pequena concentração de partículas de dispersão, então um nefelômetro é a melhor escolha. Um turbidímetro é uma escolha adequada quando as amostras têm uma alta concentração de partículas de dispersão. No NEPHELOstar Plus, partículas insolúveis levemente espalhadas são detectadas em ângulos de incidência de até 80o. Isso torna esse nefelômetro aproximadamente trinta vezes mais sensível do que os leitores de absorbância tradicionais, medindo a redução da luz direta que passa por um poço de amostra.
Em segundo lugar, o tamanho das partículas espalhadas deve ser considerado. Geralmente, os nefelômetros são mais adequados para medir a dispersão de pequenas partículas (< 1 µm), pois a intensidade da luz espalhada a 90° aumenta. O tamanho da partícula é menos importante para turbidímetros, pois a diminuição da luz transmitida é medida.
Flexibilidade
Embora um nefelômetro seja um instrumento de propósito único, a flexibilidade deve ser considerada de qualquer maneira. Isso se relaciona principalmente ao feixe de luz, pois ele desempenha um papel importante na medição da dispersão. Uma característica exclusiva do NEPHELOstar Plus é a intensidade ajustável e o diâmetro do feixe da fonte de luz laser.
Em um nefelômetro, a capacidade de ajustar a intensidade do feixe de laser melhora a sensibilidade e proporciona o melhor desempenho. Com uma largura de feixe estreita, os efeitos da superfície do líquido, como um menisco forte, são reduzidos. Além disso, permite melhor desempenho em microplacas de alta densidade de até 384 poços.
Dependendo do ensaio, o controle preciso da temperatura, os recursos de agitação multimodo e o controle atmosférico ou a exaustão de gases podem ser benéficos.
Formatos de microplacas compatíveis
Normalmente, os ensaios nefelométricos são realizados em microplacas de 96 poços. No entanto, se você tiver várias amostras e/ou desejar economizar tempo ou reagentes preciosos, placas de 384 poços também podem ser usadas. Como a dispersão também pode ser causada por poeira, sujeira ou arranhões no fundo de um poço, as microplacas usadas para nefelometria devem ser tratadas com extremo cuidado.
Injetores de reagentes
Dependendo da natureza do ensaio que você deseja executar, a disponibilidade de injetores de reagente em um nefelômetro pode ser benéfica. Ao pipetar manualmente os reagentes nos poços, você pode correr o risco de perder dados importantes sobre sua reação. Especialmente para respostas rápidas, o evento que você está procurando pode já ter desaparecido antes que o nefelômetro possa detectá-lo.
Nosso nefelômetro
A detecção baseada em nefelometria pode ser realizada no NEPHELOstar Plus, o único nefelômetro de microplacas que utiliza laser do mundo. O NEPHELOstar Plus usa um laser específico com intensidade e diâmetro ajustáveis como fonte de luz e uma esfera de Ulbricht para coletar a luz espalhada com um ângulo de até 80 graus. Graças a esses recursos, este nefelômetro é capaz de superar medições simples de turbidimetria.
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Quais ensaios podem ser medidos por um nefelômetro?
Nas ciências da vida, os nefelômetros são usados principalmente em laboratórios farmacêuticos para testar a solubilidade de medicamentos, também em triagens automatizadas. Em laboratórios bioquímicos, as principais aplicações de um nefelômetro incluem interação proteína-proteína, agregação de proteínas e estudos de polimerização. Em imunologia, a detecção nefelométrica tem sua principal aplicação no desenvolvimento de novos anticorpos e na análise de sua capacidade de ligação a antígenos.
A flexibilidade e o desempenho do NEPHELOstar Plus permitem que mais aplicações sejam adaptadas à nefelometria a laser baseada em microplacas do que nunca. Estas incluem também ensaios de floculação e cinética de crescimento bacteriano e fúngico.
Triagens automatizadas de solubilidade de drogas
Determinar a solubilidade de compostos aquosos tornou-se uma etapa inicial essencial de medição no processo de descoberta de medicamentos. Isso visa evitar telas ADME demoradas e caras de compostos de baixa solubilidade e pode ser realizada com alto rendimento em um nefelômetro. O método de dispersão demonstrou produzir resultados equivalentes aos produzidos por um método de HPLC e não é afetado por soluções coloridas..
Cinética de crescimento microbiano
O monitoramento nefelométrico contínuo das mudanças no espalhamento pode ser usado para testar drogas antimicrobianas e seus efeitos na cinética de crescimento microbiano. Entre vários parâmetros das curvas de crescimento, a duração da fase lag é fortemente afetada pela presença de drogas antimicrobianas. Esta parte inicial da curva de crescimento pode ser monitorada com mais precisão, usando o NEPHELOstar Plus em vez de um fotômetro tradicional.
Quantificação de proteínas
Na química clínica, os ensaios imunonefelométricos são usados para determinar a concentração de imunoglobulinas séricas (IgA, IgG, lgM), componentes do complemento (C3, C4), proteínas reagentes de fase aguda (PCR, transferrina), albumina e alfa-1-antitripsina. A precipitação de proteínas de proteínas globulares refere-se à formação de agregados de proteínas pela adição, por exemplo, de sal ou solvente orgânico. Em contraste, a imunoprecipitação permite que uma determinada proteína seja precipitada seletivamente por meio de uma reação anticorpo-antígeno.
Monitoramento da polimerização
Em química orgânica, a nefelometria é usada para quantificar macromoléculas, por exemplo, monitorando uma reação de polimerização.
Why to choose a BMG LABTECH nephelometer?
A BMG LABTECH é especializada na produção apenas de leitores de microplacas e traz mais de 30 anos de experiência em tecnologia de leitura de placas. Esse conhecimento fica visível nos resultados que nossos instrumentos entregam - o único fator que conta em seu laboratório! Os usuários do BMG LABTECH podem confiar para obter os melhores resultados em sensibilidade, velocidade e flexibilidade. Além disso, nossos leitores de microplacas multimodo são desenvolvidos para fornecer desempenho ideal por anos. Nossos instrumentos são desenvolvidos, produzidos e testados na Alemanha e são construídos para serem extremamente robustos e confiáveis.
Compre apenas o que você precisa
Devido à sua modularidade, todos os nossos leitores de placas de fluorescência podem ser equipados com diferentes modos de detecção e abrangem uma infinidade de aplicações. Recursos adicionais podem ser atualizados a qualquer momento. Isso lhe dá a chance de manter suas opções em aberto, mesmo que você não use todo o escopo do seu leitor de microplacas imediatamente.
Serviço e suporte completos
Nós nos esforçamos para fornecer a você o melhor atendimento ao cliente. Todos os representantes da área de vendas são especialistas técnicos altamente treinados, capazes de dar suporte a hardware, software e à maioria das questões de aplicação. Para as soluções de aplicações mais complexas, uma equipe dedicada de especialistas em aplicações também está disponível.
Pacote de software multiusuário
Todos os nossos instrumentos vêm com um pacote de software multiusuário que pode ser instalado em quantos computadores o usuário desejar, sem a necessidade de adquirir licenças. As atualizações de software para nossos leitores de microplacas são gratuitas nos primeiros 12 meses após a compra.