네펠로미터에 대한 기본 정보
네펠로미터는 샘플의 탁도 또는 탁도를 측정하는 전용 기기입니다. 탁도는 일반적으로 액체 또는 기체에 부유하는 불용성 입자의 존재로 인해 발생합니다. 탁도로 인한 빛의 감쇠(흡광도)가 아닌, 빛의 산란(샘플의 입자에서 반사된 빛)을 측정하기 위해 네펠로미터가 사용됩니다.
네펠로미터 마이크로플레이트 리더는 마이크로플레이트의 웰에 있는 샘플 용액에 존재하는 불용성 입자를 측정합니다. 샘플에 존재하는 부유 입자는 플레이트 평면의 수직 각도에서 오는 광선을 산란시킵니다. 이 산란광은 광원의 90°에서 한쪽으로 설정된 검출기에 의해 측정되며, 측정 값은 산란 강도를 의미합니다.
입자 밀도는 광산란 값은, 입자의 크기, 색상 및 모양과 같은 입자의 특정 속성에 따라 달라집니다.
네펠로미터 마이크로플레이트 리더는 신약 발굴 및 스크리닝, 생명 과학 연구 및 수질 모니터링과 같은 다양한 분야에서 탁도 및 미립자 존재를 모니터링하는 데 주로 사용되는 기기입니다. 수질 테스트에서 산란 기기는 탁도계라고도 합니다.
다양한 산란 또는 탁도 응용 분야를 위한 다양한 기기가 있습니다. 기기 간의 차이는 주로 광원과 검출기 사이의 위치와 각도에 따라 다릅니다.
네펠로미터리의 일부이지만 네펠로미터 마이크로플레이트 리더와 관련이 없는 것은 에어로졸 산란(예: 공기 중 먼지 오염)의 측정 또는 행성 대기의 연구입니다.
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네펠로미터란 무엇입니까?
네펠로미터는 광원, 광빔에 직각으로 배열된 검출기, 그리고 광학 광산란 수집기가 내장되어 있으며, 산란만 측정할 수 있고, 마이크로 플레이트를 사용할 수 있는 유일한 기기입니다.
BMG LABTEHC사의 NEPHELOstar Plus는 고감도*고강도인 레이저 다이오드(635nm)를 광원으로 사용합니다. 레이저 빔은 샘플을 통과하여, 빛을 산란시키는 입자가 없으면 빛을 똑바로 통과하여 신호(산란)가 생성되지 않습니다. 샘플에 입자가 있는 경우 빛은 Ulbricht sphere라고 하는 수집기로 분산되며, 이 분산된 빛은 sphere 내부에서 반사되어 네펠로미터의 포토다이오드에 의해 측정됩니다.
샘플 용액에서 산란 입자의 농도와 산란광 강도 사이의 관계는 광범위한 농도에 따른 선형 관계로, 네펠로미터는 광산란 검출을 통해 입자의 농도를 측정하는 데 사용할 수 있습니다. 따라서 샘플의 농도는 입자에 의해 생성된 산란의 강도에서 비롯되며, 이 양은 입자의 특성(크기, 색상, 모양, 반사율)에 따라 다릅니다.
보정된 네펠로미터 또는 환경 모니터링을 위한 탁도계로 측정한 탁도 단위는 Nephelometric Turbidity Unit (NTU)입니다. 그러나 보정된 네펠로미터로 탁도 결과를 측정하는 것은 많은 양의 샘플을 사용하는 시간 소모적인 다단계 과정입니다
애플리케이션 노트는, NEPHELOstar Plus를 사용하여 네펠로메트릭 탁도 단위(NTU)를 얻기 위한, 보다 많은 샘플 처리량과 간소화된 절치, 샘플의 소량을 사용하는 방식을 제공합니다. NEPELOstar Plus에서 RNU(Relative Nephelometry Units)로 표현된 결과 값은 기존 기기의 NTU 결과와 비교할 수 있습니다.
그럼, 네펠로미터를 사용하시겠습니까?
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네펠로미터를 선택할 때 고려해야 할 사항은 무엇입니까?
네펠로미터 또는 탁도계 구입을 고려하고 있다면, 기기의 성능과 품질이 연구 결과에 큰 영향을 미칠 수 있으므로 몇 가지 요소를 고려해야 합니다.
네펠로미터리 또는 탁도 측정
산란은 네펠로미터리와 탁도 측정에 의해 결과를 얻을 수 있습니다. 이 두 용어는 때때로 동의어로 사용되지만 위에서 언급한 것처럼 기술적으로는 그렇지 않습니다. 탁도 측정은 기본적으로 흡광도 측정이며 흡광도 마이크로플레이트 리더(탁도계)에서 수행할 수 있습니다. 네펠로미터리(직접 산란)를 측정하려면 전용 네펠로미터가 필요합니다.
산란 방법을 개발할 때 네펠로미터와 탁도계 사이의 기기 선택은 두 가지 요소에 의해 결정됩니다. 가장 중요한 고려 사항은 감도입니다. 샘플 농도가 낮은 산란 입자가 포함되어 있으면 네펠로미터가 최선의 선택입니다. 탁도계는 샘플의 산란 입자 농도가 높을 때 적합한 선택입니다. NEPHELOstar Plus에서는 최대 80o의 입사각에서 가볍게 산란된 불용성 입자를 측정합니다. 이것은 이 네펠로미터를 기존의 흡광도 리더보다 약 30배 더 민감하며, 샘플을 통과하는 직사광선의 감소를 측정합니다.
둘째, 산란 입자의 크기를 고려해야 합니다. 일반적으로 네펠로미터는 90°에서 산란된 빛의 강도가 증가함에 따라 작은 입자(< 1 µm)의 산란을 측정하는 데 더 적합합니다. 투과광의 감소가 측정되기 때문에 입자 크기는 탁도계에서 덜 중요합니다.
유연성
네펠로미터는 단일 목적의 장비이지만 어쨌든 유연성을 고려해야 합니다. 이것은 산란을 측정할 때 중요한 역할을 하기 때문에 주로 광선과 관련이 있습니다. NEPHELOstar Plus만의 단독 기능은 레이저 광원의 강도와 빔 직격을 조정할 수 있다는 것입니다.
네펠로미터에서 레이저 빔의 강도를 조정하는 기능은 감도를 향상시키고 최상의 성능을 제공합니다. 좁은 폭의 빔을 이용하여, 샘플 표면에서 발생하는 반월판 생성과 같은 효과를 감소합니다. 또한 최대 384 well plate에서 더 나은 성능을 제공합니다.
분석에 따라 정밀한 온도 제어, 다중 모드 혼합 기능, 대기 제어 또는 가스 배출 기능을 사용할 수 있습니다.
호환 가능한 마이크로플레이트
일반적으로 네펠로미터를 사용하는 실험은, 96 well plate에서 측정됩니다. 그러나 샘플 수가 많거나 고가의 시약 및 시간을 절약하기 위해 384 well plate도 사용할 수 있습니다. 산란은 plate 바닥의 먼지, 오물 또는 긁힘으로 인해 결과에 영향을 줄 수 있으므로, 발생하지 않도록 매우 주의해야 합니다.
시약 분주기
분석 목적에 따라 nephelometer에 시약 분주기를 사용하는 것이 유용할 수 있습니다. 수동으로 샘플을 분주하여 시간에 따른 반응에 대한 중요한 결과를 손실할 위험이 있는 경우 유용합니다.
네펠로미터로 측정할 수 있는 분석법은 무엇입니까?
네펠로미터로는 주로 제약 실험실에서 약물의 용해도를 테스트하는 데 사용되며 자동화 목적의 신약 개발 스크리닝에서도 사용됩니다. 생화학 실험실에서 네펠로미터의 주요 응용 분야에는 단백질-단백질 상호작용, 단백질 응집 및 중합 연구입니다. 또한, 면역학에서 새로운 항체의 개발과 항원에 대한 결합 능력의 분석에 주로 적용할 수 있습니다.
NEPHELOstar Plus의 유연성과 성능은 마이크로플레이트 기반 레이저 네펠로메트리에 적용할 수 있는 더 많은 애플리케이션을 적용할 수 있습니다. 응집 분석, 박테리아 및 곰팡이 성장 역학 분석도 가능합니다.
자동화 약물 용해도 스크리닝
수용액의 화합물 용해도는 신약 개발 과정 중 초기 단계에 측정합니다. 이는 시간 소모적이고 비용이 많이 드는 저용해도 화합물의 ADME 스크리닝을 피하고, 네페로미터에서 고효율적으로 처리량으로 수행할 수 있기 때문입니다. 산란 방법은 HPLC 방법에 의한 결과와 동일하며, 유색 용액에 크게 영향을 받지 않습니다.
미생물 성장 역학
산란의 변화에 대한 지속적인 nephelometric 모니터링은 항균 약물과 미생물 성장 역학에 대한 효과를 테스트하는 데 사용할 수 있습니다. 성장 곡선의 다양한 매개 변수 중에서 지연 단계의 기간은 항균 약물의 존재에 의해 크게 영향을 받습니다. 초기 단계의 성장 곡선 분석은, 기존의 광도계 대신 NEPHELOstar Plus를 사용하여 더 정확하게 모니터링할 수 있습니다.
단백질 정량
임상 화학에서 면역네펠로메트릭 분석은 혈청 면역글로불린(IgA, IgG, lgM), 보체 성분(C3, C4), 급성기 반응 단백질(CRP, 트랜스페린), 알부민 및 알파-1-항트립신의 농도를 결정하는 데 사용됩니다. 구형 단백질의 단백질 침전은 예를 들어 염 또는 유기 용매를 첨가하여 단백질 응집체를 형성하는 것을 의미하며, 면역 침전은 주어진 단백질이 항체-항원 반응을 통해 선택적으로 침전되도록 합니다.
중합 모니터링
유기 화학에서 네펠로메트리(nephelometry)는 예를 들어 중합 반응을 모니터링하여 거대분자를 정량화하는 데 사용됩니다.
BMG LABTECH 네펠로미터를 선택해야 하는 이유는 무엇입니까?
BMG LABTECH사는, 플레이트 기반 측정 기술에 대한 30년 이상의 완벽한 전문 기술을 기반으로, 마이크로플레이트 리더만을 전문적으로 생산하는 회사입니다. 실험실에서 매우 중요한 요소인, 민감도, 속도 및 사용의 편리함, 그리고 최상의 결과를 얻는 신뢰할 수 있는 장비를 제공합니다. 또한 수년간 최적의 성능을 얻도록 개발되었으며, 모든 전 장비는 독일에서 개발, 생산 및 테스트되었으며 매우 견고하고 신뢰할 수 있도록 제작되었습니다.
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