
Informazioni di base sui nefelometri
Il nefelometro è uno strumento dedicato alla misurazione della torbidità o opacità di un campione. La torbidità è solitamente causata dalla presenza di particelle insolubili sospese in un liquido o in un gas. Il nefelometro serve a misurare la dispersione della luce (luce riflessa dalle particelle di un campione), non l'attenuazione della luce (assorbanza) causata dalla torbidità.
I nefelometri per micropiastre misurano le particelle insolubili presenti nelle soluzioni liquide nel pozzetto di una micropiastra. La soluzione nel pozzetto viene colpita da un fascio di luce perpendicolare al piano della micropiastra. Le particelle sospese nella soluzione diffondono il fascio di luce. Nel nefelometro, la luce diffusa viene raccolta da un rilevatore posto a 90° rispetto alla sorgente luminosa. L'uscita dello strumento è l'intensità della diffusione.
La densità delle particelle viene calcolata in funzione della diffusione della luce. In una certa misura, la diffusione per una data densità di particelle dipende dalle proprietà specifiche delle particelle, come le dimensioni, il colore e la forma.
I lettori di micropiastre nefelometrici sono strumenti utilizzati principalmente per monitorare la torbidità e la presenza di particelle in vari campi, come la scoperta e lo screening di farmaci, la ricerca accademica nel campo delle scienze biologiche e il monitoraggio della qualità dell'acqua. Nell'ambito dei test sulla qualità dell'acqua, gli strumenti a diffusione sono anche chiamati turbidimetri.
Sul mercato esiste un'ampia varietà di strumenti per diverse applicazioni di diffusione o torbidità. Le differenze tra gli strumenti dipendono principalmente dalla posizione e dall'angolo tra la sorgente luminosa e il rilevatore.
Parte della nefelometria, ma non rilevante per i lettori di micropiastre nefelometrici, è la misurazione della diffusione degli aerosol (ad esempio, l'inquinamento da polveri nell'aria), o lo studio delle atmosfere planetarie mediante nefelometri in fase gassosa.
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Che cos'è un nefelometro?
Il nefelometro è uno strumento che contiene una sorgente di luce, un rivelatore disposto ad angolo retto rispetto al fascio di luce e, in mezzo, un collettore ottico per la diffusione della luce. I nefelometri sono strumenti dedicati che possono rilevare solo lo scattering e sono disponibili solo come lettori di piastre indipendenti.
Il NEPHELOstarPlus di BMG LABTECH utilizza un diodo laser (a 635 nm) con un fascio altamente collimato come sorgente luminosa ad alta intensità. Il raggio laser passa attraverso il pozzetto del campione. Se non ci sono particelle che disperdono la luce, questa passa direttamente attraverso il pozzetto e non viene generato alcun segnale. Se nel campione sono presenti particelle, la luce viene dispersa in un collettore di luce diffusa chiamato sfera di Ulbricht. In questo caso, la luce viene riflessa all'interno della sfera e infine rilevata dal fotodiodo del nefelometro.
Nelle soluzioni liquide, la relazione tra la concentrazione delle particelle che si diffondono e l'intensità della luce diffusa è lineare in un ampio intervallo di concentrazioni. In questo modo il nefelometro può essere utilizzato per misurare la concentrazione delle particelle attraverso la rilevazione della diffusione della luce. La concentrazione di un campione risulta quindi dall'intensità di diffusione prodotta dalle sue particelle. Questa intensità dipende dalla natura (dimensioni, colore, forma, riflettività) delle particelle.
L'unità di misura della torbidità, misurata con uno strumento nefelometro o turbidimetro calibrato per il monitoraggio ambientale, è l'unità di torbidità nefelometrica (NTU). Tuttavia, la misurazione dei dati di torbidità con un nefelometro calibrato è un processo che richiede tempo e più fasi e che impiega grandi volumi di campioni.
Nella nota applicativa Improving throughput for assessing nephelometric turbidity units (NTUs) using the NEPHELOstarPlus, il nostro nefelometro fornisce una maggiore produttività e un approccio semplificato e a basso volume per la raccolta dei dati NTU. I dati espressi in RNU (Relative Nephelometry Units) raccolti con il NEPHELOstar Plus vengono confrontati con i risultati NTU ottenuti con uno strumento convenzionale.
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Cosa considerare quando si sceglie un nefelometro?
Se sei alla ricerca di un nefelometro o di un turbidimetro, ci sono alcuni fattori da tenere in considerazione, poiché le prestazioni possono influenzare in modo significativo la qualità dei dati della vostra ricerca.
Nefelometria o turbidimetria
La dispersione può essere misurata sia con la nefelometria che con la turbidimetria. Sebbene questi due termini vengano talvolta utilizzati come sinonimi, tecnicamente non lo sono, come già detto. La turbidimetria è fondamentalmente una misura di assorbanza e può essere eseguita su un lettore di micropiastre di assorbanza (turbidimetro). Per la misurazione della nefelometria (diffusione diretta) è necessario un nefelometro dedicato.
Quando si sviluppa un metodo di scattering, la scelta dello strumento tra nefelometro e turbidimetro è determinata da due fattori. La considerazione più importante è la sensibilità. Se il campione contiene una piccola concentrazione di particelle diffondenti, il nefelometro è la scelta migliore. Un turbidimetro è la scelta giusta quando i campioni hanno un'alta concentrazione di particelle diffondenti. Con il NEPHELOstar Plus, le particelle insolubili leggermente diffuse vengono rilevate con angoli di incidenza fino a 80o. Ciò rende questo nefelometro circa trenta volte più sensibile dei tradizionali lettori di assorbanza, che misurano la riduzione della luce diretta che passa attraverso il pozzetto del campione.
In secondo luogo, è necessario considerare le dimensioni delle particelle diffondenti. In generale, i nefelometri sono più adatti a misurare la diffusione di particelle piccole (< 1 µm), poiché l'intensità della luce diffusa a 90° aumenta. Le dimensioni delle particelle sono meno importanti per i torbidimetri, poiché viene misurata la diminuzione della luce trasmessa.
Flessibilità
Sebbene il nefelometro sia uno strumento monouso, la flessibilità deve essere comunque presa in considerazione. Ciò riguarda soprattutto il fascio di luce, che svolge un ruolo fondamentale nella misurazione della dispersione. Una caratteristica esclusiva del NEPHELOstar Plus è la possibilità di regolare l'intensità e il diametro del fascio della sorgente luminosa laser.
In un nefelometro, la possibilità di regolare l'intensità del fascio laser migliora la sensibilità e fornisce le migliori prestazioni. Con una larghezza di fascio ridotta, gli effetti della superficie del liquido, come un forte menisco, sono ridotti. Inoltre, consente prestazioni migliori in micropiastre ad alta densità fino a 384 pozzetti.
A seconda del test, possono essere utili il controllo preciso della temperatura, le capacità di agitazione multimodale e il controllo atmosferico o lo sfiato di gas.
Formati di micropiastra compatibili
Di solito i test nefelometrici vengono misurati in micropiastre da 96 pozzetti. Tuttavia, se si dispone di più campioni e/o si desidera risparmiare reagenti preziosi o tempo, è possibile utilizzare anche piastre da 384 pozzetti. Poiché la dispersione può essere causata anche da polvere, sporcizia o graffi sul fondo di un pozzetto, le micropiastre utilizzate per la nefelometria devono essere trattate con estrema cura.
Iniettori di reagenti
A seconda della natura del test che si desidera eseguire, la disponibilità di iniettori di reagenti su un nefelometro potrebbe essere vantaggiosa. Pipettando manualmente i reagenti nei pozzetti, si corre il rischio di perdere dati importanti sulla reazione. Soprattutto nel caso di risposte rapide, l'evento che si sta cercando potrebbe essere già passato prima che il nefelometro possa rilevarlo.
Il nostro nefelometro
La rilevazione basata sulla nefelometria può essere eseguita con il NEPHELOstar Plus, l'unico nefelometro per micropiastre al mondo basato su laser. Il NEPHELOstar Plus utilizza un laser specifico con intensità e diametro regolabili come sorgente luminosa e una sfera di Ulbricht per raccogliere la luce di diffusione con un angolo fino a 80 gradi. Grazie a queste caratteristiche, questo nefelometro è in grado di superare le semplici misure di torbidimetria.
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Quali test possono essere misurati da un nefelometro?
Nelle scienze biologiche, i nefelometri sono utilizzati principalmente nei laboratori farmaceutici per testare la solubilità dei farmaci, anche negli screening automatizzati. Nei laboratori biochimici, le principali applicazioni di un nefelometro includono l'interazione proteina-proteina, l'aggregazione proteica e gli studi di polimerizzazione. In immunologia, il rilevamento nefelometrico trova la sua principale applicazione nello sviluppo di nuovi anticorpi e nell'analisi della loro capacità di legame con gli antigeni.
La flessibilità e le prestazioni del NEPHELOstar Plus consentono di adattare alla nefelometria laser su micropiastra un numero maggiore di applicazioni rispetto al passato. Tra queste vi sono anche i saggi di flocculazione e la cinetica di crescita batterica e fungina.
Screening automatizzato della solubilità dei farmaci
La determinazione della solubilità dei composti acquosi è diventata una misura essenziale nella fase iniziale del processo di scoperta dei farmaci. Questo serve a evitare i lunghi e costosi screening ADME di composti a bassa solubilità e può essere eseguito con un elevato throughput su un nefelometro. È stato dimostrato che il metodo di diffusione produce risultati equivalenti a quelli ottenuti con un metodo HPLC e che non è influenzato da soluzioni colorate.
Cinetica di crescita microbica
Il monitoraggio nefelometrico continuo delle variazioni di diffusione può essere utilizzato per testare i farmaci antimicrobici e i loro effetti sulla cinetica di crescita microbica. Tra i vari parametri delle curve di crescita, la durata della fase di ritardo è fortemente influenzata dalla presenza di farmaci antimicrobici. Questa parte iniziale della curva di crescita può essere monitorata con maggiore precisione, utilizzando NEPHELOstar Plus al posto di un fotometro tradizionale.
Quantificazione delle proteine
In chimica clinica, i test immunonefelometrici sono utilizzati per determinare la concentrazione delle immunoglobuline sieriche ( IgA, IgG, lgM), dei componenti del complemento (C3, C4), delle proteine reagenti alla fase acuta (CRP, transferrina), dell'albumina e dell'alfa-1-antitripsina. La precipitazione proteica di proteine globulari si riferisce alla formazione di aggregati proteici mediante l'aggiunta, ad esempio, di sale o solvente organico. L'immunoprecipitazione, invece, consente di precipitare selettivamente una determinata proteina attraverso una reazione anticorpo-antigene.
Monitoraggio della polimerizzazione
In chimica organica, la nefelometria viene utilizzata per quantificare le macromolecole, ad esempio monitorando una reazione di polimerizzazione.

Perché scegliere un nefelometro BMG LABTECH?
BMG LABTECH è specializzata nella produzione di lettori di micropiastre e vanta oltre 30 anni di esperienza nella tecnologia di lettura delle piastre. Questa conoscenza è visibile nei risultati che i nostri strumenti forniscono - l'unico fattore che conta nel vostro laboratorio! Gli utenti di BMG LABTECH possono fidarsi di ottenere i migliori risultati in termini di sensibilità, velocità e flessibilità. Inoltre, i nostri lettori di micropiastre multimodali sono stati sviluppati per fornire prestazioni ottimali per anni. I nostri strumenti sono sviluppati, prodotti e testati in Germania e sono costruiti per essere estremamente robusti e affidabili.
Acquistate solo ciò che vi serve
Grazie alla loro modularità, tutti i nostri lettori di micropiastre a fluorescenza possono essere dotati di diverse modalità di rilevamento e coprire una moltitudine di applicazioni. Le funzioni aggiuntive possono essere aggiornate in qualsiasi momento. Questo vi dà la possibilità di mantenere aperte le vostre opzioni anche se non utilizzate subito l'intera portata del vostro lettore di micropiastre.
Assistenza e supporto a 360 gradi
Ci impegniamo a fornirvi il miglior servizio di assistenza al cliente. Tutti i rappresentanti dell'area vendite sono specialisti tecnici altamente qualificati, in grado di supportare sia l'hardware che il software e la maggior parte delle domande relative alle applicazioni. Per le soluzioni applicative più complesse è disponibile anche un team di specialisti applicativi dedicati.
Pacchetto software multiutente
Tutti i nostri strumenti sono dotati di un pacchetto software multiutente che può essere installato su tutti i computer necessari agli utenti, senza la necessità di acquistare licenze. Gli aggiornamenti del software per i nostri lettori di micropiastre sono gratuiti entro i primi 12 mesi dall'acquisto.