Información básica sobre nefelómetros
Un nefelómetro es un instrumento diseñado para medir la turbidez de una muestra. Esta turbidez es causada, generalmente, por la presencia de partículas insolubles suspendidas en un líquido o gas. Se usa un nefelómetro para medir la dispersión de la luz (la luz reflejada por las partículas en una muestra), en lugar de la atenuación de la luz (absorbancia) causada por dicha turbidez.
Los lectores de microplacas nefelométricos miden las partículas insolubles presentes en soluciones líquidas en el pocillo de una microplaca. La solución del pocillo es iluminada por un haz de luz perpendicular al plano de la microplaca. Las partículas en suspensión en la solución dispersarán este haz de luz. En el nefelómetro, la luz dispersada es recogida por un detector situado a un lado, a 90° de la fuente de luz. El resultado del instrumento es la intensidad de la dispersión.
La densidad de partículas se calcula en función de la dispersión de la luz. Hasta cierto punto, la dispersión para una determinada densidad de partículas depende de las propiedades específicas de las partículas, como su tamaño, color y forma.
Los lectores de microplacas de nefelometría son instrumentos que se utilizan principalmente para monitorear la turbidez y la presencia de partículas en diversos campos, como el descubrimiento y la detección de fármacos, la investigación académica en ciencias de la vida y el control de la calidad del agua. En las pruebas de calidad del agua, los instrumentos de dispersión también se denominan turbidímetros.
Existe una amplia variedad de instrumentos en el mercado para diferentes aplicaciones de dispersión o turbidez. Las diferencias entre los instrumentos dependen principalmente de la posición y el ángulo entre la fuente de luz y el detector.
Parte de la nefelometría, pero no relevante para los lectores de microplacas de nefelómetro, es la medición de la dispersión de aerosoles (p. ej., contaminación por polvo en el aire) o el estudio de las atmósferas planetarias mediante nefelómetros de fase gaseosa.
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¿Qué es un nefelómetro?
Un nefelómetro es un instrumento que contiene una fuente de luz, un detector dispuesto en ángulo recto con respecto al haz de luz y, en medio, un colector óptico de dispersión de luz. Los nefelómetros son instrumentos dedicados que solo pueden detectar dispersión y solo están disponibles como lectores de placas independientes.
NEPHELOstar Plus de BMG LABTECH utiliza un diodo láser (a 635 nm) con un haz altamente colimado como fuente de luz de alta intensidad. El rayo láser atraviesa el pocillo de la muestra. Si no hay partículas que dispersen la luz, esta pasa directamente y no se genera ninguna señal. En caso de que haya partículas presentes en la muestra, la luz se dispersa en un colector de luz dispersa llamado esfera de Ulbricht. Aquí, la luz se refleja alrededor del interior de la esfera y finalmente es detectada por el fotodiodo del nefelómetro.
En soluciones líquidas, la relación entre la concentración de partículas dispersas y la intensidad de la luz dispersada es lineal en un amplio rango de concentraciones. De esta manera, se puede utilizar un nefelómetro para medir la concentración de partículas mediante la detección de la dispersión de la luz. La concentración de una muestra resulta, por tanto, de la intensidad de la dispersión producida por sus partículas. Esta cantidad depende de la naturaleza (tamaño, color, forma, reflectividad) de las partículas.
La unidad de turbidez, medida con un nefelómetro calibrado o instrumento turbidímetro para la monitorización ambiental, es la Unidad Nefelométrica de Turbidez (NTU). Sin embargo, medir los datos de turbidez con un nefelómetro calibrado es un proceso largo, de varios pasos y que requiere grandes volúmenes de muestra.
En la nota de aplicación Mejora del rendimiento para evaluar las unidades de turbidez nefelométrica (NTU) con NEPHELOstar Plus, nuestro nefelómetro proporciona un mayor rendimiento y un enfoque simplificado y de bajo volumen para la recopilación de datos de NTU. Los datos expresados en RNU (unidades relativas de nefelometría) recopilados en NEPHELOstar Plus se comparan con los resultados de NTU de un instrumento convencional.
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¿Qué tener en cuenta a la hora de elegir un nefelómetro?
Si está buscando un nefelómetro o turbidímetro en el mercado, hay algunos factores que debe tener en cuenta, ya que el rendimiento puede afectar significativamente la calidad de los datos de su investigación.
Nefelometría o turbidimetría
La dispersión se puede medir tanto por nefelometría como por turbidimetría. Aunque estos dos términos se usan a veces como sinónimos, técnicamente no lo son, como ya hemos mencionado anteriormente. La turbidimetría es básicamente una medición de absorbancia y se puede realizar en un lector de microplacas de absorbancia (turbidímetro). Para medir la nefelometría (dispersión directa), se necesita un nefelómetro específico.
Al desarrollar un método de dispersión, la elección del instrumento entre nefelómetro y turbidímetro está determinada por dos factores. La consideración más importante es la sensibilidad. Si la muestra contiene una pequeña concentración de partículas dispersas, la mejor opción es un nefelómetro. Un turbidímetro es una opción adecuada cuando las muestras tienen una alta concentración de partículas dispersas. En NEPHELOstar Plus, las partículas insolubles ligeramente dispersas se detectan en ángulos de incidencia de hasta 80º. Esto hace que este nefelómetro sea aproximadamente treinta veces más sensible que los lectores de absorbancia tradicionales, midiendo la reducción de la luz directa que pasa a través de un pocillo de muestra.
En segundo lugar, hay que tener en cuenta el tamaño de las partículas dispersas. En general, los nefelómetros son más adecuados para medir la dispersión de partículas pequeñas (< 1 µm), ya que la intensidad de la luz dispersa a 90° aumenta. El tamaño de las partículas es menos importante para los turbidímetros, ya que se mide la disminución de la luz transmitida.
Flexibilidad
Aunque un nefelómetro es un instrumento de un solo fin, se debe tener en cuenta la flexibilidad. Esto se refiere principalmente al haz de luz, ya que juega un papel importante en la medición de la dispersión. Una característica exclusiva de NEPHELOstar Plus es la intensidad y el diámetro del haz ajustables de la fuente de luz láser.
En un nefelómetro, la capacidad de ajustar la intensidad del haz de láser mejora la sensibilidad y proporciona el mejor rendimiento. Con un ancho de haz estrecho, se reducen los efectos de la superficie del líquido, como un menisco fuerte. Además, permite un mejor rendimiento en microplacas de alta densidad de hasta 384 pocillos.
Dependiendo del ensayo, podría ser beneficioso un control preciso de la temperatura, capacidades de agitación multimodo y control atmosférico o una salida de gas.
Formatos de microplacas compatibles
Los ensayos nefelométricos se miden normalmente en microplacas de 96 pocillos. Sin embargo, si tiene varias muestras y/o desea ahorrar reactivos o tiempo, también se pueden utilizar placas de 384 pocillos. Dado que la dispersión también puede estar causada por polvo, suciedad o arañazos en el fondo de un pocillo, las microplacas utilizadas para la nefelometría deben tratarse con extremo cuidado.
inyectores de reactivos
Dependiendo de la naturaleza del ensayo que desee ejecutar, la disponibilidad de inyectores de reactivos en un nefelómetro podría resultar beneficiosa. Al pipetear manualmente los reactivos en los pocillos, puede correr el riesgo de perder datos importantes sobre la reacción. Especialmente para respuestas rápidas, es posible que el evento que está buscando ya haya desaparecido antes de que el nefelómetro pueda detectarlo.
Nuestro nefelómetro
La detección basada en nefelometría se puede realizar en NEPHELOstar Plus, el único nefelómetro de microplacas basado en láser del mundo. El NEPHELOstar Plus utiliza un láser específico con intensidad y diámetro ajustables como fuente de luz y una esfera de Ulbricht para recoger la luz dispersa con un ángulo de hasta 80 grados. Gracias a estas características, este nefelómetro puede superar las mediciones simples de turbidimetría.
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¿Qué ensayos se pueden medir con un nefelómetro?
En ciencias de la vida, los nefelómetros se utilizan principalmente en laboratorios farmacéuticos para probar la solubilidad de las drogas, también en exámenes automatizados. En los laboratorios bioquímicos, las principales aplicaciones de un nefelómetro incluyen la interacción proteína-proteína, la agregación de proteínas y los estudios de polimerización. En inmunología, la detección nefelométrica tiene su principal aplicación en el desarrollo de nuevos anticuerpos y el análisis de su capacidad de unión a antígenos.
La flexibilidad y el rendimiento de NEPHELOstar Plus permiten adaptar más aplicaciones que nunca a la nefelometría láser basada en microplacas. Estos incluyen también ensayos de floculación y cinética de crecimiento bacteriano y fúngico.
Exámenes automatizados de solubilidad de fármacos
La determinación de la solubilidad de los compuestos acuosos se ha convertido en una medida inicial esencial en el proceso de descubrimiento de fármacos. El objetivo es evitar los costosos y largos análisis ADME de compuestos de baja solubilidad, y puede realizarse con un alto rendimiento en un nefelómetro. Se ha demostrado que el método de dispersión produce resultados equivalentes a los obtenidos con el método HPLC y que no se ve afectado en gran medida por las soluciones coloreadas.
Cinética de crecimiento microbiano
El control nefelométrico continuo de los cambios en la dispersión se puede utilizar para analizar los fármacos antimicrobianos y sus efectos sobre la cinética del crecimiento microbiano. Entre los diversos parámetros de las curvas de crecimiento, la duración de la fase de latencia se ve muy afectada por la presencia de fármacos antimicrobianos. Esta parte inicial de la curva de crecimiento se puede controlar con mayor precisión utilizando el NEPHELOstar Plus en lugar de un fotómetro tradicional.
Cuantificación de proteínas
En química clínica, los ensayos inmunonefelométricos se utilizan para determinar la concentración de inmunoglobulinas séricas (IgA, IgG, lgM), componentes del complemento (C3, C4), proteínas reactivas de fase aguda (CRP, transferrina), albúmina y alfa-1-antitripsina. La precipitación de proteínas globulares se refiere a la formación de agregados proteicos mediante la adición, por ejemplo, de sal o disolvente orgánico. Por el contrario, la inmunoprecipitación permite precipitar selectivamente una proteína determinada mediante una reacción anticuerpo-antígeno.
Seguimiento de la polimerización
En química orgánica, la nefelometría se utiliza para cuantificar macromoléculas, por ejemplo, controlando una reacción de polimerización.
¿Qué ensayos se pueden medir con un nefelómetro?
BMG LABTECH se especializa exclusivamente en la fabricación de lectores de microplacas y cuenta con más de 30 años de experiencia en tecnología de lectura de placas. Este conocimiento se refleja en los resultados que ofrecen nuestros instrumentos, ¡el único factor que cuenta en su laboratorio! Los usuarios de BMG LABTECH pueden confiar en que obtendrán los mejores resultados en cuanto a sensibilidad, velocidad y flexibilidad. Además, nuestros lectores de microplacas multimodo están diseñados para ofrecer un rendimiento óptimo durante años. Nuestros instrumentos se desarrollan, producen y prueban en Alemania y están fabricados para ser extremadamente robustos y fiables.
Compre solo lo que necesita
Gracias a su modularidad, todos nuestros lectores de placas de fluorescencia pueden equiparse con diferentes modos de detección y cubren una gran variedad de aplicaciones. Las funciones adicionales se pueden actualizar en cualquier momento. Esto le permite mantener abiertas sus opciones, incluso si no utiliza todo el potencial de su lector de microplacas desde el principio.
Servicio y asistencia integral
Nos esforzamos por ofrecerle el mejor servicio de atención al cliente. Todos los representantes de ventas son especialistas técnicos altamente cualificados, capaces de resolver cualquier duda sobre el hardware, el software y la mayoría de las aplicaciones. Para las soluciones de aplicaciones más complejas, también contamos con un equipo de especialistas en aplicaciones.
Paquete de software multiusuario
Todos nuestros instrumentos incluyen un paquete de software multiusuario que se puede instalar en tantos ordenadores como necesiten los usuarios, sin necesidad de adquirir licencias. Las actualizaciones de software para nuestros lectores de microplacas son gratuitas durante los primeros 12 meses tras la compra.